microRNA

microRNA (von altgriechisch μικρός mikrós ‚klein‘), abgekürzt miRNA oder miR, sind kurze, hoch konservierte, nichtcodierende Ribonukleinsäuren, die eine wichtige Rolle in dem komplexen Netzwerk der Genregulation spielen, insbesondere beim Gen-Silencing. MicroRNAs regulieren die Genexpression hochspezifisch auf der post-transkriptionalen Ebene. Im Allgemeinen weisen microRNAs eine Größe von 21 bis 23 Nukleotiden (nt) auf, doch können es auch einige Hundert sein (siehe Abbildung).

Haarnadelstruktur einer pre-microRNA

Geschichte

1993 wurden erstmals microRNAs beschrieben, der Name microRNA wurde jedoch erst 2001 geprägt. Im Nematoden Caenorhabditis elegans codierte das Gen lin-4 überraschenderweise nicht für ein Protein, sondern für zwei kleine RNA-Moleküle mit einer Länge von ungefähr 60 nt und ca. 20 nt. Das längere Molekül stellt nach heutigem Kenntnisstand die pre-microRNA dar. Bei dem Molekül mit ca. 20 Nukleotiden handelt es sich um die reife microRNA. Diese kleinere RNA lin-4 reguliert das Gen lin-14, indem sie sich durch Basenpaarung komplementär an die 3'-UTR der lin-14-mRNA bindet und damit die Translation der mRNA vermindert. Mit der Entdeckung einer weiteren miRNA (let-7) konnte gezeigt werden, dass es sich nicht um ein außergewöhnliches Phänomen bei C. elegans handelt. Let-7 reguliert das Gen lin-41; die Gene let-7 und lin-41 sind evolutionär konserviert. Der Mechanismus der microRNA-Regulation ist auch bei anderen multizellulären Organismen anzutreffen. In den letzten Jahren sind die Erkenntnisse über microRNAs stetig gewachsen. Die Datenbank miRBase zeigte einen Zuwachs von über 4000 Sequenzen innerhalb von zwei Jahren. Auch verzeichnet die Datenbank Pubmed einen starken Anstieg der Veröffentlichungen zum Thema microRNAs. Die genauen biologischen Funktionen der meisten microRNAs sind aber noch nicht bekannt. Nach computerbasierten Vorhersagen könnten etwa 20–30 % der Gene im menschlichen Genom durch microRNAs reguliert sein. Es darf angenommen werden, dass bis einige Tausend unterschiedliche microRNAs codiert werden.

Biogenese

Die Transkription und Wirkung ist am Beispiel der Säugetiere beschrieben. Mit Abweichungen, z. B. bei den beteiligten Proteinkomponenten, ist der Wirk-Mechanismus in den verschiedenen Spezies vergleichbar. Die Gene für die miRNAs befinden sich im Genom, sie werden von einer RNA-Polymerase II oder III transkribiert. Das entstandene Primärtranskript hat eine Länge von 500 bis 3000 Nukleotiden und trägt den üblichen Poly-A-Schwanz am 3'-Ende sowie ein 7-Methylguanosin-Cap am 5'-Ende. Das Primärtranskript heißt primary microRNA (pri-miRNA) und lagert sich zu einer Schleife zusammen. Die RNase III (Drosha) und das dsRNA-Bindeprotein DGCR8 (entspricht Pasha bei Drosophila melanogaster) formen einen Mikroprozessor-Komplex, durch den im Kern einer Zelle die pri-miRNA zu einer etwa 70–80 Nukleotide großen precursor microRNA (pre-miRNA) prozessiert wird. Die pre-miRNA formt dabei eine charakteristische Haarnadelstruktur (hairpin). Die pre-miRNA wird durch Exportin-5 in Anwesenheit von Ran-GTP als Kofaktor über die Kernporen der Kernmembran aktiv in das Cytoplasma exportiert. Im Zytoplasma werden die pre-miRNAs durch das RNAse-III-Enzym Dicer in 17–24 nt lange ds-miRNAs geschnitten. Dicer interagiert mit dem ds-RNA-Bindeprotein TRBP (RDE-4 in C. elegans und Loquacious in Drosophila melanogaster). Dicer lädt die noch immer doppelsträngige miRNA auf ein Protein namens Argonaut 2 (AGO2), wodurch der RNA-induced silencing complex-loading complex gebildet wird, der aus Dicer, TRBP und AGO2 besteht. AGO2 entfernt einen Strang, den Passagierstrang, und bildet mit dem miRNA-Leitstrang den RNA-induced silencing complex (miRISC). Sobald RISC sich gebildet hat, spürt er seine Ziel-mRNA auf, indem er nach Übereinstimmungen der Basensequenzen sucht. Damit es zur Interaktion von RISC oder Ziel-mRNA kommen kann, bedarf es einer Komplementarität bei ca. 7 Basenpaaren, wobei vor allem die Nucleotide 2–8, vom 5‘-Ende der miRNA betrachtet, wichtig sind. Eine höhere Komplementarität verbessert die Bindung.

Wie genau AGO2 den miRNA-Leitstrang auswählt und „weiß“, welcher Strang abgebaut werden soll, ist noch unklar. Es ist jedoch bekannt, dass die Auswahl gezielt erfolgt. Zwei Faktoren scheinen eine besonders wichtige Rolle zu spielen: Erstens ist wichtig, welche Nucleobase am 5’-Ende steht, wobei Uracil bevorzugt wird. Zweitens kann der Strang, der ein thermodynamisch instabiles 5’-Ende besitzt, einfacher vom RISC aufgenommen werden. Abhängig davon bildet der miRNA-Strang mit dem 5’-Terminus an seinem Ende die reife miRNA, die auch guide RNA genannt wird. Der Passagierstrang wird in Annotation mit einem Stern markiert. Diese miRNA* kann möglicherweise in wenigen Fällen auch regulatorisch wirken.

Die Auswahl jener mRNA, die abgebaut werden soll, erfolgt nach Komplementarität mit der miRNA. Je mehr Basen von mRNA und miRNA komplementär sind, desto besser funktioniert die Repression der Translation. Außerdem binden die miRNAs bevorzugt an die 3’-UTR (untranslated region) der mRNA. Wenn RISC am 3‘-Ende der mRNA andockt, hat er mehr Zeit für die Repression der Translation – und die Zeit ist ein großer Faktor, da die mRNA rasch im Cytosol translatiert wird.

Die reife miRNA wird in einen Ribonukleoproteinkomplex aufgenommen (miRNP), der eine große Ähnlichkeit zum RISC-Komplex des RNAi-Pathways aufweist. Durch diesen miRISC Komplex kann die Aktivität der Zielgene durch zwei Methoden herunterreguliert werden. Die Wirkmechanismen der microRNAs und der sogenannten small interfering RNAs (siRNAs) weisen deutliche Parallelen auf. siRNAs werden von der RNase III Dicer aus langen doppelsträngigen RNAs (dsRNAs) prozessiert und als 21–28 nt lange einzelsträngige RNAs in den siRISC-Komplex aufgenommen. Dieser Komplex vermittelt die mRNA-Degradation.

Mechanismus der Genregulation

Die Genregulation erfolgt bei Tieren durch Bindung der microRNAs an die 3’ untranslatierte Region (3’-UTR) der mRNA von Zielgenen, die je nach Komplementarität der Bindesequenz und der beteiligten Proteine entweder an der Translation gehemmt oder durch Zerschneiden abgebaut werden. RISC stehen im Wesentlichen drei Möglichkeiten zur Verfügung, die Genexpression zu regulieren: a) die Inhibition der Translation mit anschließendem Abbau der mRNA, b) die Inhibition ohne deren Abbau sowie c) der direkte Abbau der mRNA, bevor die Translation initiiert wird.

Die Inhibition der Translation (Varianten a und b) ist häufiger als der direkte Abbau des mRNA-Strangs (Variante c), da die Varianten a und b eine geringere Komplementarität mit der Ziel-mRNA verlangen. Das am breitesten akzeptierte Modell für miRNA-vermitteltes silencing ist, dass es zuerst zur Inhibition der Translation kommt, gefolgt vom Abbau der mRNA.

Bei Variante a reicht die mRNA-miRNA Komplementarität nicht aus, damit AGO2 die mRNA eigenhändig abbauen kann. Daher müssen weitere Proteine rekrutiert werden. Federführend ist dabei GW182, das Decapping- und Deadenylierungsfaktoren rekrutiert. Durch Entfernen der Cap-Struktur und des Poly(A)Schwanzes wird die mRNA stark destabilisiert. Ein dritter Proteinkomplex, XNR1 genannt, baut die mRNA anschließend in 5‘-3‘-Richtung ab.

Variante b, die Translationsinhibition ohne mRNA-Abbau, ist komplizierter und die ausgearbeiteten Mechanismen bedürfen noch experimenteller Validierung. Ein Mechanismus, der postuliert wird, beinhaltet zwei wichtige Initiationsfaktoren (eIF4E und eIF4G). Sie werden durch RISC inhibiert und dissoziieren von der Translationsmaschinerie. Ohne sie kann die kleine ribosomale Untereinheit nicht an die 5‘-Cap-Struktur binden – der mRNA-Strang wird nicht translatiert. Variante a scheint häufiger als b zu sein.

Seltener kommt es zum direkten Abbau des mRNA-Strangs durch RISC. Dafür muss die miRNA weitreichend, wenn nicht gar vollständig komplementär mit der mRNA sein, was beim Menschen anders als bei Pflanzen unüblich ist. Die meisten miRNAs haben sich evolutiv so entwickelt, dass sie eben nicht perfekt komplementär sind, damit sie mehr Gene regulieren können. Es handelt sich um einen Kompromiss zwischen Genauigkeit und Effizienz.

Eine weitere RNA-Klasse, die ebenfalls über RNAi die Genexpression regulieren, sind die small interfering RNAs (siRNAs). Weil miRNAs und siRNAs sehr ähnlich prozessiert werden und auswechselbare biochemische Funktionen haben, ist die Unterscheidung nicht ganz einfach. miRNAs entstehen aus Haarnadel-artigen Strukturen. siRNAs hingegen entstammen einer langen RNA-Vorlage (dsRNA), aus der dann mehrere siRNAs gewonnen werden können. Aus einer Haarnadel kann immer nur eine miRNA extrahiert werden. Ein weiterer, äußerst relevanter Unterschied ist die Spezifität. Während siRNAs immer nur an eine mRNA andocken können, haben miRNAs oft mehrere Ziele (durchschnittlich 200 mRNAs). Dieser Umstand liegt in der imperfekten Komplementarität der miRNAs begründet: Sie können an eine mRNA andocken, obgleich einige Basen nicht komplementär sind – das geht bei siRNAs nicht. Während siRNAs den (irreversiblen) Abbau der mRNA herbeiführen, können miRNAs die Translation temporär unterdrücken und dissoziieren, wenn das Protein dann doch benötigt wird.

Obwohl microRNAs von der Forschung viel Aufmerksamkeit genossen, ist ein zentraler Mechanismus noch kaum erforscht. microRNAs werden fast immer als negative Regulatoren der Genexpression angesehen. Verschiedene Review-Artikel zeigen jedoch, dass microRNAs ebenfalls die Translation zu stimulieren vermögen. Wie sie das tun, ist aber in vielen Fällen fast gänzlich ungeklärt. Eine Publikation aus dem Jahr 2007 konnte Folgendes nachweisen: Es wurden Zellen untersucht, deren Zellzyklus gestoppt worden war. In diesem Zustand half eine microRNAs (miR-369-3), die normalerweise die Translation unterdrückt, den Zellzyklus zu aktivieren, indem sie einen Initiationskomplex bildete. Das ist insofern erstaunlich, als dass AGO2, das eigentlich für den Abbau der mRNA verantwortlich zu sein schien, daran beteiligt ist. Dieses Phänomen konnte in der G₀/G₁-Phase beobachtet werden. Wenn die Zellen jedoch proliferierten, blieb das aus. Weitere Arbeiten sekundieren, dass miRNAs die Expression stimulieren können. Einige Publikationen gehen sogar noch weiter und postulieren, dass die Stimulation der Genexpression die Hauptaufgabe von miRNAs sei. Das untermauere der Umstand, dass die Genexpression abnahm, wenn die AGO-Gene durch Knockout ausgeschaltet werden. Das widerspreche der weitverbreiteten Annahme, miRNAs würden Gene überwiegend stilllegen.

Expression

MicroRNAs haben sehr unterschiedliche Expressionsmuster und werden in der Entwicklung und in physiologischen Prozessen unterschiedlich reguliert. Die Expression ist meist gewebespezifisch zusammen mit nahegelegenen Genen organisiert. MicroRNAs können innerhalb von Exons oder Introns proteincodierender Gene, oder in nichtcodierenden Regionen lokalisiert sein. Manche microRNAs besitzen eigene Promotoren. Wenige microRNAs liegen in einem Cluster vor und werden gemeinsam transkribiert.

Aktuelle Forschung

Die Untersuchung der microRNA ist ein neues und sehr aktuelles Thema in der Molekular- und Zellbiologie. Die Arbeit mit miRNAs erweist sich schwieriger als mit mRNAs, da sie aufgrund ihrer geringen Größe und ubiquitärem Vorkommen von Abbauenzymen schnell degradiert werden. Die Quantifizierung von miRNA erfordert deswegen ständiges Arbeiten unter Kühlung sowie speziell aufbereitete, RNase-freie Gerätschaften. Klassischerweise erfolgt die Untersuchung von miRNA-Expressionsniveaus durch Umschreiben der RNA in synthetische DNA (cDNA) und deren anschließende Quantifizierung mittels quantitativer PCR. Neuerdings ist es auch möglich, miRNA-Expression auf speziellen Microarray-Plattformen zu messen, eine Methode, die sich wachsender Beliebtheit erfreut. Zwar erlaubt dies die gleichzeitige Bestandsaufnahme hunderter miRNAs, allerdings ist die Nachbearbeitung der Daten, wie bei Microarrays üblich, aufwändig und häufig mit großer Streuung verbunden. Dies kann jedoch häufig durch die anschließende Analyse der Datensätze, die im Bestfall zusätzlich Informationen zu den regulierten mRNAs umfassen, kompensiert werden.

In den vergangenen Jahren wurde festgestellt, dass die miRNAs als bedeutende Regulatoren der Genübersetzung (Translation) nach der Genüberschreibung (Transkription) fungieren. Dies geschieht über die spezifische Anhaftung an mRNA-Moleküle, deren Übersetzung in Proteine somit erschwert, völlig verhindert oder auch erleichtert wird.

In Säugetierzellen konnten bislang über 800 unterschiedliche miRNAs nachgewiesen werden; beim Menschen sind derzeit über 1.800 verschiedene miRNA-Spezies bekannt, die in Sammlungen, sog. Bibliotheken, vorliegen (Stand 11/2013,) Der Vergleich von Wirbellosen- und Wirbeltierzellen zeigt, dass die Struktur einiger dieser Moleküle hochgradig konserviert ist, was auf eine wichtige gemeinsame evolutionäre Funktion in sehr unterschiedlichen Spezies schließen lässt.

Experimentelle und informatische Studien legen den Schluss nahe, dass jede miRNA einige mRNA-Moleküle regulieren kann, und dass 20–30 % aller menschlichen Gene von miRNAs mitgesteuert werden.

Die Art und Anzahl im Zellkern hergestellter miRNA-Moleküle zeigt oft eine enge Korrelation mit dem Entwicklungsstand der Zelle (Zellteilung, Differenzierung in bestimmte Zelltypen, Apoptose (programmierter Zelltod bei Fehlern)). Die miRNAs wirken dabei in einem regulatorischen Netzwerk mit Transkriptionsfaktoren (TFn) zusammen. So belegen aktuelle Studien die kritische Funktion von miRNAs bei frühen Entwicklungsprozessen von Tieren, zum Beispiel Neurogenese, Myogenese (Muskelbildung), Kardiogenese (Herzbildung,) und Hämatopoese (Blutbildung). miRNAs spielen auch bei Pflanzen eine wichtige Rolle.

Weiterhin wurde vorgeschlagen, dass miRNAs sehr wichtig für die Unterdrückung von zellulären Transformationen wie Tumorbildung sind, da eine fehlerhafte Bildung von miRNA-Molekülen in Zellen diese unerwünschten Prozesse verstärkt. Deregulation von miRNAs wurde in diversen Tumorarten beobachtet und scheint tumorspezifische Charakteristiken aufzuweisen. Der Einfluss des als Tumorsuppressor bekannten p53-Proteins auf die Reifung verschiedener miRNAs, die das Zellwachstum hemmen, legt diesen Schluss ebenfalls nahe.

Neuere Forschungen zeigen, dass bestimmte miRNAs für die Aufrechterhaltung der Pluripotenz und der Selbsterneuerung von embryonalen Stammzellen wichtig sind. microRNAs könnten daher in Zukunft nützliche molekularbiologische Werkzeuge für die Manipulation von Stammzellen darstellen.

Zu Forschungszwecken können zelluläre microRNA-Moleküle mit Hilfe komplementärer Antagomire inhibiert werden.

Das Auftreten bestimmter microRNA kann eventuell auch für die Diagnose von Erkrankungen, z. B. Myokarditis genutzt werden.

Neuste Ergebnisse deuten darauf hin, dass miRNA durch Nahrung aufgenommen wird und Prozesse im Körper beeinflusst.

Die Basenfolgen der verschiedenen miRNA sind bei Säugern identisch oder fast identisch. Diese Übereinstimmungen sind im Internet über Datenbank-Abfragen (z. B. miRBase) überprüfbar. Gleichzeitig besteht eine Organspezifität bei allen Spezies, so dass in den gleichen Organen unterschiedlicher Säuger identische miRNA-Typen ihre Funktionen im Rahmen der Modulation der Proteinbiosynthese übernehmen.

miRNA wird auch von der parasitären Nordamerikanischen Seide (Ordnung Nachtschattenartige) in ihre Wirtspflanze eingeschleust, vermutlich, um deren Abwehr zu unterdrücken.

Wichtige microRNAs in der menschlichen Zelle

Die microRNA-335(-5p), deren Transkriptvorlage sich in der Gensequenz für MEST befindet, wurde als wichtiger Regulator bei der Entstehung von malignen Tumoren erkannt, aber auch als krebsfördernde Oncomir erkannt.

Im Jahr 2005 entdeckten Chan und Mitarbeiter, dass miR21 in Zellen von Glioblastomen stark überexprimiert war. miR21 wurde auch bei zahlreichen anderen Tumoren, wie Brustkrebs, Dickdarmkrebs, Bronchialkarzinom, Bauchspeicheldrüsenkrebs, Prostatakarzinom, Leberzellkarzinom, Magenkrebs, Eierstockskrebs, Zervixkarzinom, Kopf-Hals-Tumoren, Leukämien und anderen entdeckt. An Zelllinien nicht kleinzelliger Bronchalkarzinome (NSCLC) wurde gefunden, dass die Hemmung von miR21 mit einem Antikörper das Wachstum, die Migration und die Invasion der Tumorzellen vermindert. Die Resistenz gegen ionisierende Strahlen und Chemotherapeutika wurde durch miR21 gesteigert. Die Expression von PTEN, einem wichtigen Signalmolekül bei der Apoptose, wurde durch Anti-mR21 erhöht. Das bedeutet, dass Tumorzellen, die miR21 überexprimieren, an der Apoptose gehindert werden. Die Bedeutung von miR21 für das blutbildende System konnte an miR21-Knockout-Mäusen, bei denen das Gen für die Synthese von miR21 ausgeschaltet wurde, erforscht werden. Dabei wurde gefunden, dass die Empfindlichkeit gegenüber einer Ganzkörperbestrahlung durch die Ausschaltung von miR21 erhöht war. Als Ursache wurde eine Beeinträchtigung der hämatopoetischen Stamm- und Progenitorzellen gefunden, was zu einer Knochenmarksinsuffizienz führte.

Die miR-193b wird durch STAT5 reguliert und moduliert die Expression von KIT, einer für Blutstammzellen wichtigen Rezeptor-Tyrosinkinase. Es ist an der Erneuerung und Expansion von Blutstammzellen und Progenitorzellen (Blutvorläuferzellen) beteiligt. Eine Dysregulation von miR-193b ist mit der Pathogenese und der Aggressivität der akuten myeloischen Leukämie (AML) verknüpft.

Die microRNA-145 vermindert die Expression von Oct-4, einem stammzelltypischen Gen. Ihr Ausfall fördert daher die Entstehung von Krebsstammzellen.

Die microRNAs der Familie miR-302 sind typisch für humane embryonale Stammzellen und werden von den Pluripotenzgenen Oct-4 und Sox-2 reguliert.

Chronobiologie

Im Jahr 2021 stellte sich heraus, dass MicroRNA an der Einstellung der chronobiologischen Perioden-Längen entscheidend beteiligt ist. Dabei ist sowohl die Menge der MikroRNA von Bedeutung (Dosisabhängigkeit) als auch der Gewebetyp (Lunge, Gehirn, Netzhaut).

Nomenklaturregeln

Die Namengebung der microRNAs erfolgt nach der zeitlichen Reihenfolge der Sequenzierung. Die ersten drei Buchstaben bezeichnen den Organismus (z. B. hsa- Homo sapiens).

Unterschiedliche Vorläufer-Sequenzen und genomische Loci, die identische reife Sequenzen exprimieren, erhalten Namen der Form hsa-mir-121-1 und hsa-mir-121-2. Mit Buchstaben bezeichnete Suffixe benennen eng verwandte reife Sequenzen – zum Beispiel hsa-miR-121a und miR-hsa-121b.

miRNA-Klonierungsstudien identifizieren manchmal zwei ca. 22 Basen lange Sequenzen, die von demselben vorhergesagten Vorläufer stammen. Wenn die relativen Mengen klar angeben, welche die überwiegende miRNA-Form ist, werden die reifen Sequenzen durch Namen der Form miR-56 (Hauptprodukt) und miR-56* (aus dem entgegengesetzten Arm der Vorstufe) zugeordnet. Wenn die Daten nicht ausreichend sind, um zu bestimmen, welche Sequenz die vorherrschende ist, werden Namen wie miR-142-5p (vom 5'-Arm) und miR-142-3p (vom 3'-Arm) vergeben.

Eine ältere Konvention, die manchmal verwendet wird, lautet z. B. miR-142 und miR-s-142-AS.

Siehe auch

• Kleine RNA
• Antisense-RNA
• RNA-Interferenz

Literatur

• Xiao Junjie: Microrna: From Bench to Bedside. In: Elsevier Science. 2022, ISBN 978-0-323-89774-7
• David Bartel: Metazoan MicroRNAs. In: Cell. März 2018, S. 20–51, doi:10.1016/j.cell.2018.03.006. 
• Hiro-oki Iwakawa, Yukihide Tomari: Life of RISC: Formation, action, and degradation of RNA-induced silencing complex. In: Cell. 2022, doi:10.1016/j.molcel.2021.11.026. 
• David Bartel: MicroRNAs: target recognition and regulatory functions. In: Cell. 2009, doi:10.1016/j.cell.2009.01.002. 
• Cameron Bracken: “Crowd-control” by RNA: a pervasive theme in biology. In: RNA. Juli 2023, doi:10.1261/rna.079644.123. 

Weblinks

• microRNA-Datenbank
• Nature Reviews Focus on MicroRNA. nature.com

Einzelnachweise

1. L. He, G. J. Hannon: MicroRNAs: small RNAs with a big role in gene regulation. In: Nat. Rev. Genet. Band 5, Nr. 7, 2004, S. 522–531. PMID 15211354
2. R. Lee u. a.: The C. elegans heterochronic gene lin-4 encodes small RNAs with antisense complementarity to lin-14. In: Cell. Band 75, Nr. 5, 1993, S. 843–854. PMID 8252621
3. G. Ruvkun: Molecular biology. Glimpses of a tiny RNA world. In: Science. Band 294, Nr. 5543, 2001, S. 797–799. PMID 11679654
4. R. Lee u. a.: A short history of a short RNA. In: Cell. Band 116, Supplement 2, 2004, S. 89–92. PMID 15055592
5. B. J. Reinhart u. a.: The 21-nucleotide let-7 RNA regulates developmental timing in Caenorhabditis elegans. Nature, 403(6772), 2000, S. 901–906. PMID 10706289
6. E. Wienholds, R.H. Plasterk: MicroRNA function in animal development. In: FEBS Lett. Band 579, Nr. 26, 2005, S. 5911–5922. PMID 16111679
7. B. P. Lewis u. a.: Conserved seed pairing, often flanked by adenosines, indicates that thousands of human genes are microRNA targets. In: Cell. Band 120, Nr. 1, 2005, S. 15–20. PMID 15652477
8. X. Xie u. a.: Systematic discovery of regulatory motifs in human promoters and 3’ UTRs by comparison of several mammals. In: Nature. Band 434, Nr. 7031, 2005, S. 338–345. PMID 15735639
9. Qiuying Yang, Liande Li, Zhihong Xue, Qiaohong Ye, Lin Zhang, Shaojie Li, Yi Liu: Transcription of the Major Neurospora crassa microRNA–Like Small RNAs Relies on RNA Polymerase III. In: PLoS Genetics. Band 9, Nr. 1, 17. Januar 2013, ISSN 1553-7404, doi:10.1371/journal.pgen.1003227, PMID 23349642, PMC 3547838 (freier Volltext). 
10. Gracjan Michlewski, Javier F. Cáceres: Post-transcriptional control of miRNA biogenesis. In: RNA. Band 25, Nr. 1, Januar 2019, ISSN 1355-8382, S. 1–16, doi:10.1261/rna.068692.118, PMID 30333195, PMC 6298569 (freier Volltext). 
11. Ke Wu, Juan He, Wenchen Pu, Yong Peng: The Role of Exportin-5 in MicroRNA Biogenesis and Cancer. In: Genomics, Proteomics & Bioinformatics. Band 16, Nr. 2, April 2018, S. 120–126, doi:10.1016/j.gpb.2017.09.004, PMID 29723684, PMC 6112314 (freier Volltext). 
12. Gunter Meister: Argonaute proteins: functional insights and emerging roles. In: Nature Reviews Genetics. Band 14, Nr. 7, Juli 2013, ISSN 1471-0056, doi:10.1038/nrg3462. 
13. Ashley Mohr, Justin Mott: Overview of MicroRNA Biology. In: Seminars in Liver Disease. Band 35, Nr. 01, 29. Januar 2015, ISSN 0272-8087, S. 003–011, doi:10.1055/s-0034-1397344, PMID 25632930, PMC 4797991 (freier Volltext). 
14. Hiroshi I Suzuki, Akihiro Katsura, Takahiko Yasuda, Toshihide Ueno, Hiroyuki Mano, Koichi Sugimoto, Kohei Miyazono: Small-RNA asymmetry is directly driven by mammalian Argonautes. In: Nature Structural & Molecular Biology. Band 22, Nr. 7, Juli 2015, ISSN 1545-9993, S. 512–521, doi:10.1038/nsmb.3050. 
15. Kumiko Ui-Tei, Kenji Nishi, Tomoko Takahashi, Tatsuya Nagasawa: Thermodynamic Control of Small RNA-Mediated Gene Silencing. In: Frontiers in Genetics. Band 3, 2012, ISSN 1664-8021, doi:10.3389/fgene.2012.00101, PMID 22675333, PMC 3366367 (freier Volltext). 
16. V. Narry Kim, Jin-Wu Nam: Genomics of microRNA. In: Trends in Genetics. Band 22, Nr. 3, März 2006, S. 165–173, doi:10.1016/j.tig.2006.01.003. 
17. Isidore Rigoutsos: New Tricks for Animal MicroRNAs: Targeting of Amino Acid Coding Regions at Conserved and Nonconserved Sites. In: Cancer Research. Band 69, Nr. 8, 15. April 2009, ISSN 0008-5472, S. 3245–3248, doi:10.1158/0008-5472.CAN-09-0352. 
18. K. Okamura, E. C. Lai: Endogenous small interfering RNAs in animals. In: Nat. Rev. Mol. Cell. Biol. Band 9, Nr. 9, 2008, S. 673–678. PMID 18719707
19. Ariel A. Bazzini, Miler T. Lee, Antonio J. Giraldez: Ribosome Profiling Shows That miR-430 Reduces Translation Before Causing mRNA Decay in Zebrafish. In: Science. Band 336, Nr. 6078, 13. April 2012, ISSN 0036-8075, S. 233–237, doi:10.1126/science.1215704, PMID 22422859, PMC 3547538 (freier Volltext). 
20. Julien Béthune, Caroline G Artus‐Revel, Witold Filipowicz: Kinetic analysis reveals successive steps leading to miRNA‐mediated silencing in mammalian cells. In: EMBO reports. Band 13, Nr. 8, August 2012, ISSN 1469-221X, S. 716–723, doi:10.1038/embor.2012.82, PMID 22677978, PMC 3410385 (freier Volltext). 
21. Stephen W. Eichhorn, Huili Guo, Sean E. McGeary, Ricard A. Rodriguez-Mias, Chanseok Shin, Daehyun Baek, Shu-hao Hsu, Kalpana Ghoshal, Judit Villén, David P. Bartel: mRNA Destabilization Is the Dominant Effect of Mammalian MicroRNAs by the Time Substantial Repression Ensues. In: Molecular Cell. Band 56, Nr. 1, Oktober 2014, S. 104–115, doi:10.1016/j.molcel.2014.08.028, PMID 25263593, PMC 4292926 (freier Volltext). 
22. Hiro-oki Iwakawa, Yukihide Tomari: Life of RISC: Formation, action, and degradation of RNA-induced silencing complex. In: Molecular Cell. Band 82, Nr. 1, Januar 2022, S. 30–43, doi:10.1016/j.molcel.2021.11.026 (elsevier.com [abgerufen am 11. Juli 2023]). 
23. Chao Fang, Haishen Xie, Jun Zhao, Weichen Wang, Hui Hou, Bin Zhang, Dachen Zhou, Xiaoping Geng: eIF4E-eIF4G complex inhibition synergistically enhances the effect of sorafenib in hepatocellular carcinoma. In: Anti-Cancer Drugs. Band 32, Nr. 8, September 2021, ISSN 0959-4973, S. 822–828, doi:10.1097/CAD.0000000000001074, PMID 33783376, PMC 8366763 (freier Volltext). 
24. Daehyun Baek, Judit Villén, Chanseok Shin, Fernando D. Camargo, Steven P. Gygi, David P. Bartel: The impact of microRNAs on protein output. In: Nature. Band 455, Nr. 7209, September 2008, ISSN 0028-0836, S. 64–71, doi:10.1038/nature07242, PMID 18668037, PMC 2745094 (freier Volltext). 
25. Matthias Selbach, Björn Schwanhäusser, Nadine Thierfelder, Zhuo Fang, Raya Khanin, Nikolaus Rajewsky: Widespread changes in protein synthesis induced by microRNAs. In: Nature. Band 455, Nr. 7209, September 2008, ISSN 0028-0836, S. 58–63, doi:10.1038/nature07228 (nature.com [abgerufen am 11. Juli 2023]). 
26. Huili Guo, Nicholas T. Ingolia, Jonathan S. Weissman, David P. Bartel: Mammalian microRNAs predominantly act to decrease target mRNA levels. In: Nature. Band 466, Nr. 7308, August 2010, ISSN 0028-0836, S. 835–840, doi:10.1038/nature09267, PMID 20703300, PMC 2990499 (freier Volltext). 
27. J. E. Braun, E. Huntzinger, E. Izaurralde: A Molecular Link between miRISCs and Deadenylases Provides New Insight into the Mechanism of Gene Silencing by MicroRNAs. In: Cold Spring Harbor Perspectives in Biology. Band 4, Nr. 12, 1. Dezember 2012, ISSN 1943-0264, doi:10.1101/cshperspect.a012328, PMID 23209154, PMC 3504443 (freier Volltext). 
28. Victor Ambros: The evolution of our thinking about microRNAs. In: Nature Medicine. Band 14, Nr. 10, Oktober 2008, ISSN 1078-8956, S. 1036–1040, doi:10.1038/nm1008-1036. 
29. Richard W. Carthew, Erik J. Sontheimer: Origins and Mechanisms of miRNAs and siRNAs. In: Cell. Band 136, Nr. 4, Februar 2009, S. 642–655, doi:10.1016/j.cell.2009.01.035, PMID 19239886, PMC 2675692 (freier Volltext). 
30. Ines Alvarez-Garcia, Eric A. Miska: MicroRNA functions in animal development and human disease. In: Development. Band 132, Nr. 21, 1. November 2005, ISSN 1477-9129, S. 4653–4662, doi:10.1242/dev.02073. 
31. D.P. Bartel: MicroRNAs: genomics, biogenesis, mechanism, and function. In: Cell. Band 116, 2004, S. 281–297. PMID 14744438
32. Victor Ambros: The evolution of our thinking about microRNAs. In: Nature Medicine. Band 14, Nr. 10, Oktober 2008, ISSN 1078-8956, S. 1036–1040, doi:10.1038/nm1008-1036. 
33. Shobha Vasudevan, Yingchun Tong, Joan A. Steitz: Switching from Repression to Activation: MicroRNAs Can Up-Regulate Translation. In: Science. Band 318, Nr. 5858, 21. Dezember 2007, ISSN 0036-8075, S. 1931–1934, doi:10.1126/science.1149460 (science.org [abgerufen am 16. Juli 2023]). 
34. Faezeh Jame-Chenarboo, Hoi Hei Ng, Dawn Macdonald, Lara K. Mahal: High-Throughput Analysis Reveals miRNA Upregulating α-2,6-Sialic Acid through Direct miRNA–mRNA Interactions. In: ACS Central Science. Band 8, Nr. 11, 23. November 2022, ISSN 2374-7943, S. 1527–1536, doi:10.1021/acscentsci.2c00748, PMID 36439307, PMC 9686205 (freier Volltext) – (acs.org [abgerufen am 16. Juli 2023]). 
35. Shobha Vasudevan: Posttranscriptional Upregulation by MicroRNAs: Posttranscriptional Upregulation by MicroRNAs. In: Wiley Interdisciplinary Reviews: RNA. Band 3, Nr. 3, Mai 2012, S. 311–330, doi:10.1002/wrna.121 (wiley.com [abgerufen am 16. Juli 2023]). 
36. S. S. Truesdell, R. D. Mortensen, M. Seo, J. C. Schroeder, J. H. Lee, O. LeTonqueze, S. Vasudevan: MicroRNA-mediated mRNA Translation Activation in Quiescent Cells and Oocytes Involves Recruitment of a Nuclear microRNP. In: Scientific Reports. Band 2, Nr. 1, 13. November 2012, ISSN 2045-2322, doi:10.1038/srep00842, PMID 23150790, PMC 3496365 (freier Volltext). 
37. Yongjun Chu, Audrius Kilikevicius, Jing Liu, Krystal C Johnson, Shinnichi Yokota, David R Corey: Argonaute binding within 3′-untranslated regions poorly predicts gene repression. In: Nucleic Acids Research. 5. Juni 2020, ISSN 0305-1048, doi:10.1093/nar/gkaa478, PMID 32501500, PMC 7367155 (freier Volltext). 
38. L.Chang-Gong u. a.: MicroRNA expression profiling using microarrays. In: Nature Protocols. Band 3, 2008, S. 563–578.
39. S. Artmann u. a.: Detection of Simultaneous Group Effects in MicroRNA Expression and Related Target Gene Sets. In: PLoS ONE. Band 7, Nr. 6, 2012, e38365.
40. S. Dudoit u. a.: Multiple hypothesis testing in microarray experiments. In: Stat Sci. Band 18, 2003, S. 71–103.
41. Kye-Seong Kim: A study of microRNAs in silico and in vivo: emerging regulators of embryonic stem cells. In: FEBS J. Band 276, Nr. 8, 2009, S. 2140–2149.
42. V. K. Gangaraju, H. Lin: MicroRNAs: key regulators of stem cells. In: Nat. Rev. Mol. Cell Biol. Band 10, Nr. 2, 2009, S. 116–125.
43. www.mirbase.org/
44. K. H. Yeom u. a.: Characterization of DGCR8/Pasha, the essential cofactor for Drosha in primary miRNA processing. In: Nucleic Acids Res. Band 34, 2006, S. 4622–4629.
45. E.V. Makeyev u. a.: The MicroRNA miR-124 promotes neuronal differentiation by triggering brain-specific alternative pre-mRNA splicing. In: Mol. Cell. Band 27, 2007, S. 435–448.
46. P. K. Rao u. a.: Myogenic factors that regulate expression of muscle-specific microRNAs. In: Proc. Natl. Acad. Sci. USA. Band 103, 2006, S. 8721–8726.
47. Y. Zhao u. a.: Serum response factor regulates a muscle-specific microRNA that targets Hand2 during cardiogenesis. In: Nature. Band 436, 2005, S. 214–220.
48. C.Z. Chen u. a.: Micro-RNAs modulate hematopoietic lineage differentiation. In: Science. Band 303, 2004, S. 83–86.
49. J.F. Palatnik u. a.: Control of leaf morphogenesis by microRNAs. In: Nature. Band 425, 2003, S. 257–263.
50. A. Ventura u. a.: Targeted deletion reveals essential and overlapping functions of the miR-17 through 92 family of miRNA clusters. In: Cell. Band 132, 2008, S. 875–886.
51. J. Lu u. a.: MicroRNA expression profiles classify human cancers. In: Nature. Band 435, 2005, S. 834–838.
52. H. Suzuki u. a.: Modulation of microRNA processing by p53. In: Nature. Band 460, 2009, S. 529–533.
53. Rafael Blanco-Domínguez, Raquel Sánchez-Díaz, Hortensia de la Fuente et al.: A Novel Circulating MicroRNA for the Detection of Acute Myocarditis. In: New England Journal of Medicine. Band 384, 27. Mai 2021, S. 2014–2027, doi:10.1056/NEJMoa2003608. 
54. Lin Zhang u. a.: Exogenous plant MIR168a specifically targets mammalian LDLRAP1: evidence of cross-kingdom regulation by microRNA. In: Cell Research. 2011.
55. miRBase.org
56. Christie Wilcox: Das Geheimnis der parasitischen Riesenblumen. Auf. spektrum.de vom 19. Juli 2022. Quelle: DNA of Giant ‘Corpse Flower’ Parasite Surprises Biologists. Auf: Quanta Magazine vom 21. April 2021.
57. O. Dohi, K. Yasui, Y. Gen, H. Takada, M. Endo, K. Tsuji, C. Konishi, N. Yamada, H. Mitsuyoshi, N. Yagi, Y. Naito, S. Tanaka, S. Arii, T. Yoshikawa: Epigenetic silencing of miR-335 and its host gene MEST in hepatocellular carcinoma. In: International Journal of Oncology. Band 42, Nr. 2, Feb 2013, S. 411–418. doi:10.3892/ijo.2012.1724.
58. L. Shi, D. Jiang, G. Sun, Y. Wan, S. Zhang, Y. Zeng, T. Pan, Z. Wang: miR-335 promotes cell proliferation by directly targeting Rb1 in meningiomas. In: J Neurooncol. Band 110, Nr. 2, Nov 2012, S. 155–162. doi:10.1007/s11060-012-0951-z.
59. Jennifer A. Chan, Anna M. Krichevsky, Kenneth S. Kosik: MicroRNA-21 Is an Antiapoptotic Factor in Human Glioblastoma Cells. In: Cancer Research. Band 65, Nr. 14, 15. Juli 2005, ISSN 0008-5472, S. 6029–6033, doi:10.1158/0008-5472.CAN-05-0137 (aacrjournals.org [abgerufen am 15. September 2020]). 
60. Anna M. Krichevsky, Galina Gabriely: miR-21: a small multi-faceted RNA. In: Journal of Cellular and Molecular Medicine. Band 13, Nr. 1, 16. Oktober 2008, S. 39–53, doi:10.1111/j.1582-4934.2008.00556.x, PMID 19175699, PMC 3823035 (freier Volltext) – (wiley.com [abgerufen am 15. September 2020]). 
61. Zhi-Li Liu, He Wang, Jing Liu, Zhao-Xia Wang: MicroRNA-21 (miR-21) expression promotes growth, metastasis, and chemo- or radioresistance in non-small cell lung cancer cells by targeting PTEN. In: Molecular and Cellular Biochemistry. Band 372, Nr. 1-2, Januar 2013, ISSN 0300-8177, S. 35–45, doi:10.1007/s11010-012-1443-3 (springer.com [abgerufen am 15. September 2020]). 
62. Matthew V. Puccetti, Clare M. Adams, Tu D. Dan, Ajay Palagani, Brittany A. Simone: MicroRNA-21 is Required for Hematopoietic Cell Viability After Radiation Exposure. In: International Journal of Radiation Oncology*Biology*Physics. Band 104, Nr. 5, August 2019, S. 1165–1174, doi:10.1016/j.ijrobp.2019.04.020, PMID 31039423, PMC 6986889 (freier Volltext) – (elsevier.com [abgerufen am 15. September 2020]). 
63. Nadine Haetscher, Yonatan Feuermann, Susanne Wingert, Maike Rehage, Frederic B Thalheimer: STAT5-regulated microRNA-193b controls haematopoietic stem and progenitor cell expansion by modulating cytokine receptor signalling. In: Nature Communications. Band 6, 25. November 2015, ISSN 2041-1723, S. 8928, doi:10.1038/ncomms9928, PMID 26603207, PMC 4674773 (freier Volltext). 
64. Raj Bhayadia, Kathrin Krowiorz, Nadine Haetscher, Razan Jammal, Stephan Emmrich: Endogenous Tumor Suppressor microRNA-193b: Therapeutic and Prognostic Value in Acute Myeloid Leukemia. In: Journal of Clinical Oncology. Band 36, Nr. 10, 2018, ISSN 0732-183X, S. 1007–1016, doi:10.1200/JCO.2017.75.2204 (ascopubs.org [abgerufen am 16. Mai 2019]). 
65. R. Yin, S. Zhang, Y. Wu, X. Fan, F. Jiang, Z. Zhang, D. Feng, X. Guo, L. Xu: microRNA-145 suppresses lung adenocarcinoma-initiating cell proliferation by targeting OCT4. In: Oncol Rep. Band 25, Nr. 6, Jun 2011, S. 1747–1754. doi:10.3892/or.2011.1252. Epub 2011 Apr 7
66. J. Ren, P. Jin, E. Wang, F. M. Marincola, D. F. Stroncek: MicroRNA and gene expression patterns in the differentiation of human embryonic stem cells. In: J Transl Med. Band 7, 23. Mar 2009, S. 20. doi:10.1186/1479-5876-7-20.
67. D. A. Card, P. B. Hebbar, L. Li, K. W. Trotter, Y. Komatsu, Y. Mishina, T. K. Archer: Oct4/Sox2-regulated miR-302 targets cyclin D1 in human embryonic stem cells. In: Mol Cell Biol. Band 28, Nr. 20, Oct 2008, S. 6426–6438. doi:10.1128/MCB.00359-08. Epub 2008 Aug 18
68. Lili Zhou, Caitlyn Miller, Loren J. Miraglia, Angelica Romero, Ludovic S. Mure, Satchidananda Panda, Steve A. Kay: A genome-wide microRNA screen identifies the microRNA-183/96/182 cluster as a modulator of circadian rhythms. In: Proc Natl Acad Sci. Band 118, Nr. 1, 5. Januar 2021, S. e2020454118, doi:10.1073/pnas.2020454118 (pnas.org): „In this phenotype-driven study, we started from a genome-wide cell-based functional screen and identified miRNAs that modulate circadian rhythms. The majority of the hits lengthened the period, but a very small number of hits were found to shorten the period.“ 
69. miRBase:Sequences.