Histonmodifikation

Histonmodifikationen sind chemische Veränderungen an Histon-Proteinen, die unter anderem Einfluss auf die Transkription haben. Diese Modifikationen sind im Gegensatz zu Mutationen absichtlich, reversibel und dienen der Genregulation – also dafür, dass die Expression von Genen reguliert (gesteigert oder inhibiert) wird.

Arten von Modifikationen

Histonmodifikationen wurden sowohl an den unstrukturierten N- und C-terminalen Enden der Histon-Proteine als auch in dem globulären Bereich innerhalb des Nukleosomen-Kerns gefunden.

Nomenklatur

Um Histonmodifikationen zu bezeichnen, hat sich folgende Nomenklatur entwickelt:

1. Der Name des Histons (z. B. H3)
2. Die betroffene Aminosäure in ihrem Einbuchstabencode (z. B. K für Lysin) mit der Position der Aminosäure im Protein
3. Die Art der Modifikation (me: Methyl, P: Phosphat, Ac: Acetyl, Ub: Ubiquitin)
4. Bei Methylierung kann zusätzlich die Anzahl der Methylgruppen (bei Lysinen und Argininen) als auch die Symmetrie (bei dimethylierten Argininen) angegeben werden.

Beispiele:

• Trimethylierung des Lysins an Position 4 des Histon 3: H3K4me3
• symmetrische Methylierung des Arginins 8 am Histon 3: H3R8me2s
• Acetylierung des Lysins an Position 20 am Histon 4: H4K20Ac

Acetylierung

Histon-Acetylierung findet ausschließlich an Lysinen statt (z. B. H3K9Ac, H3K27Ac, H4K16Ac, H4K20Ac). Die Hauptwirkung der Acetylgruppe ist die Neutralisierung der positiven Ladung des Lysins. Hierfür wird von einem Acetyl-Coenzym A an die ε-NH⁺-Gruppe des Lysins eine Acetylgruppe durch Histon-Acetyltransferasen (HAT) übertragen. Die Konsequenz ist eine Verringerung der elektrostatischen Wechselwirkung zwischen dem Lysin und den negativen Ladungen an der DNA. Dies führt zu einer Öffnung der 30 nm-Faser (Solenoidstruktur), was das Binden von Transkriptionsfaktoren sowie der Transkriptionsmaschinerie erlaubt und so die Transkription begünstigt (Euchromatin). Histon-Acetylierungen werden erzeugt durch Histon-Acetyltransferasen (HAT) und wieder entfernt durch Histon-Deacetylasen (z. B. HDAC4). Bei den Histon-Acetyltransferasen werden zwei Gruppen unterschieden: Typ A und Typ B. Die Typ A-Enzyme acetylieren die Histone im Chromatin am N-Terminus. Typ B HATs sind überwiegend im Cytoplasma aktiv. Dort acetylieren sie diejenigen Histone, die noch nicht in das Chromatin integriert sind. Der Umkehrprozess, die Deacetylierung, wird durch die Histon-Deacetylase katalysiert und führt zur Verstärkung der elektrostatisches Wechselwirkung (Heterochromatin).

Mechanismus der Lysin-Acetylierung

Methylierung

Histon-Methylierung findet man sowohl an Lysinen als auch an Argininen. Histon-Methylierung kann sowohl positiv als auch negativ mit Transkription korrelieren, je nachdem, welches Lysin/Arginin man betrachtet. Außerdem können Lysine mit ein, zwei oder drei und Arginine mit bis zu zwei Methylgruppen modifiziert sein. Diese verschiedenen Methylierungszustände sind oft unterschiedlich im Genom verteilt und haben daher wahrscheinlich auch unterschiedliche biologische Funktionen. Histon-Methylierung wird erzeugt durch Histon-Methyltransferasen (HMT) und entfernt durch Histon-Demethylasen (HDM). Mechanistisch liegt dem Prozess ein nucleophiler Angriff der Aminogruppe des Restes zugrunde. Der Methyldonor ist dabei meist (S)-Adenosylmethionin (SAM).

Wichtige Methylierungen sind:

• H3K4me2/3 (findet man an den Promotoren von aktiv transkribierten Genen)
• H3K27me3 (findet man an reprimierten Genen)
• H3K9me3 (findet man im Heterochromatin)
• H3K4me1/2 (findet man an aktiven Enhancern)
• H3K36me3, H4K20me1 (findet man im Gen-Körper von aktiv transkribierten Genen)

Phosphorylierung

Histon-Phosphorylierung – also das Anfügen oder Entfernen von Phosphatgruppen – kann an Aminosäuren mit einer Hydroxygruppe stattfinden, also an Serinen, Threoninen und Tyrosinen. Hierbei wird von ATP eine Phosphatgruppe durch die Kinase an die Hydroxy-Gruppe übertragen. Die Phosphorylierung wird durch Kinasen oder Phosphatasen kontrolliert. Dadurch steigt die negative Ladung der Histone signifikant an und verändert somit die Struktur des Chromatins. Über die Phosphatasen ist weniger bekannt, es wird aber eine hohe Aktivität im Zellkern (Nucleus) vermutet. Histon-Phosphorylierungen sind in ihrer Funktion ähnlich divers wie Histon-Methylierungen.

Weitere bekannte Modifikationen

• Propionylierung
• Butyrylierung
• Ubiquitinylierung
• ADP-Ribosylierung
• Sumoylierung
• Carbonylierung
• Glycosylierung
• Biotinylierung
• cis-trans-Isomerisierung an Prolinen
• Citrullinierung an Argininen

Histon-Code

→ Hauptartikel: Histon-Code

Neben dem direkten Einfluss auf die Chromatin-Struktur, wie zum Beispiel durch Acetylierung, scheinen viele Histonmodifikationen nur indirekt Einfluss auf biologische Prozesse zu haben. Die Entdeckung einer Vielzahl von Proteinen, die bestimmte Histonmodifikationen (insbesondere Methylierungen) erkennen können ("Histone Reader"), lassen den Schluss zu, dass viele Modifikationen als Bindestelle für Proteine dienen, die die Information in nachfolgende Prozesse übersetzen. Da jedes Nukleosom eine große Zahl potentieller Modifikationsstellen hat und diese wiederum mehrere verschiedene Modifikationen aufweisen können (z. B. kann ein Lysin unmodifiziert, acetyliert, mono-, di- oder trimethyliert sein), kann ein einzelnes Nukleosom eine enorme Anzahl von verschiedenen Kombinationen besitzen. Man spricht in diesem Zusammenhang auch von der Histon-Code-Hypothese. Die Hypothese besagt, dass die Kombination verschiedener Histon-Modifikationen durch bindende Proteine abgelesen und deren Zusammenwirken zu bestimmten biologischen Prozessen führt. Die Richtigkeit dieser Hypothese ist derzeit Gegenstand intensiver Diskussion.

Beispiel eines Histon-Codes der Histone H3 und H4 (zwangsläufig unvollständig)

Histon	Modifikation	Heterochromatin	Euchromatin	Kombinatorik und Folgen
H3	Lys4me	+
H3	Lys9me(1-3)	+	HP1-(PcG-)Bindung; fördert DNAme, hemmt Ser10p, hemmt generell Lys-ac
H3	Lys-ac	+
H3	Ser10p	(+)	(+)	hemmt Lys9me u.u.; fördert Lys9, 14ac und umgekehrt
H3	Lys14ac
H3	Lys27me
H3	Lys36me
H4	Arg3me	+	EsaI Bindung; fördert Lys5ac und umgekehrt
H4	Lys5ac
H4	Lys12ac	+
H4	Lys16ac	fördert His18p und umgekehrt
H4	His18p	hemmt Lys20me
H4	Lys20me	fördert Lys16ac

1. Bedeutung der Abkürzungen siehe bei Nomenklatur.
2. PcG: Polycomb Group Protein
3. Wo „+“-Symbole geklammert sind, hängt der Effekt von der Kombinatorik verschiedener Modifikationen ab
4. Esa1: Acetyltransferase, ein aktivierendes Enzym

Die Interaktion von Histonen und DNA wird durch Histonmodifikationen gesteuert. Diese Modifikationen können die Chromatinstruktur verändern und so zu Veränderungen der Genaktivität führen. Somit können diese epigenetischen Mechanismen die Transkription einzelner Gene oder ganzer Gruppen von Genen beeinflussen.

Quellen

• T. Jenuwein, C. D. Allis: Translating the Histone Code In: Science. 293(5532), 2001, S. 1074–1080. PMID 11498575
• B. D. Strahl, C. D. Allis: The language of covalent histone modifications. In: Nature. 403(6765), 2000, S. 41–45. PMID 10638745

1. Die Kontrolle von Histonmodifikationen durch nicht- kodierende RNAs und Ecdyson-Signalling. Naturwissenschaftlichen Fakultät I – Biowissenschaften - der Martin-Luther-Universität Halle-Wittenberg, 2015, abgerufen am 22. Juni 2022. 
2. Andrew J. Bannister, Tony Kouzarides: Regulation of chromatin by histone modifications. In: Cell Research. Band 21, Nr. 3, März 2011, ISSN 1748-7838, S. 381–395, doi:10.1038/cr.2011.22. Fehler in Vorlage:Literatur – *** Parameterproblem: Dateiformat/Größe/Abruf nur bei externem Link
3. Yu-Chieh Wang, Suzanne E Peterson, Jeanne F Loring: Protein post-translational modifications and regulation of pluripotency in human stem cells. In: Cell Research. Band 24, Nr. 2, Februar 2014, ISSN 1001-0602, S. 143–160, doi:10.1038/cr.2013.151, PMID 24217768, PMC 3915910 (freier Volltext) – (nature.com [abgerufen am 17. Februar 2021]).