5 Brom 4 chlor 3 indoxylphosphat BCIP ist ein artifizielles chromogenes Substrat für das Enzym Alkalische Phosphatase AP

Strukturformel
Allgemeines
Name	5-Brom-4-chlor-3-indoxylphosphat
Andere Namen	(5-Brom-4-chlor-1H-indol-3-yl)dihydrogenphosphat; BCIP; X-Phosphat; X-Phos;
Summenformel	C8H8BrClNO4P
Kurzbeschreibung	hellgrauer Feststoff (Dinatriumsalz)
Externe Identifikatoren/Datenbanken
CAS-Nummer	38404-93-2; 102185-33-1 (Di-Natrium-Salz); 6578-06-9 (p-Toluidin-Salz);
PubChem	65409
ChemSpider	58873
Wikidata	Q238472
Eigenschaften
Molare Masse	326,47 g·mol−1
Löslichkeit	wenig in Wasser (20 mg·ml−1, Dinatriumsalz)
Sicherheitshinweise
GHS-Gefahrstoffkennzeichnung	keine GHS-Piktogramme
	keine GHS-Piktogramme
H- und P-Sätze	H: keine H-Sätze
	P: keine P-Sätze
	Soweit möglich und gebräuchlich, werden SI-Einheiten verwendet. Wenn nicht anders vermerkt, gelten die angegebenen Daten bei Standardbedingungen.

5-Brom-4-chlor-3-indoxylphosphat (BCIP) ist ein artifizielles, chromogenes Substrat für das Enzym Alkalische Phosphatase (AP).

Eigenschaften Bearbeiten

Das Enzym Alkalische Phosphatase hydrolysiert Indolylphosphat zu 5-Brom-4-chlorindolyl und Phosphat. Das 5-Brom-4-chlorindolyl wird vom Sauerstoff der Luft zum tiefblauen Farbstoff 5,5′-Dibrom-4,4′-dichlorindigo oxidiert.

Enzymatische Spaltung von X-Phos (BCIP) mittels der Alkalischen Phosphatase (AP) führt zur Bildung von 5-Brom-4-chlor-indolyl (1). Dieses bildet nach Oxidation an der Luft und Dimerisierung den blauen Farbstoff 5,5′-Dibrom-4,4′-dichlor-indigo (2).

Da BCIP in vielen Lösungsmitteln schwer löslich ist, wird entweder das Di-Natrium-Salz (wasserlöslich) oder häufiger das p-Toluidin-Salz (löslich in DMF) verwendet.

Verwendung Bearbeiten

In der Biochemie wird BCIP im Zuge einer Immunfärbung in Kombination mit NBT zur sensitiven Detektion des Enzyms Alkalische Phosphatase (AP) benutzt.

Siehe auch Bearbeiten

X-Gal
X-Gluc

Einzelnachweise Bearbeiten

↑ Datenblatt 5-Bromo-4-chloro-3-indolyl phosphate disodium salt bei Sigma-Aldrich, abgerufen am 19. Dezember 2018 (PDF).
Externe Identifikatoren von bzw. Datenbank-Links zu Dinatrium-5-Brom-4-chlor-3-indoxylphosphat: CAS-Nummer: 102185-33-1, EG-Nummer: 600-286-2, ECHA-InfoCard: 100.106.217, PubChem: 6097197, ChemSpider: 2006838, Wikidata: Q72452877.
Externe Identifikatoren von bzw. Datenbank-Links zu 5-Brom-4-chlor-3-indoxylphosphat-di-p-Toluidinsalz: CAS-Nummer: 6578-06-9, EG-Nummer: 229-506-1, ECHA-InfoCard: 100.026.824, PubChem: 68768006, ChemSpider: 73132, Wikidata: Q72452880.
James McGadey: A tetrazolium method for non-specific alkaline phosphatase, in: Histochemie, 1970, 23, S. 180–184; PMID 5507043; doi:10.1007/BF00305851.
David A. Knecht, Randall L. Dimond: Visualization of antigenic proteins on Western blots, in: Anal. Biochem., 1984, 136, S. 180–184; PMID 6201085; doi:10.1016/0003-2697(84)90321-X.

[Sigma-1] Datenblatt 5-Bromo-4-chloro-3-indolyl phosphate disodium salt bei Sigma-Aldrich, abgerufen am 19. Dezember 2018 (PDF).

[2] Externe Identifikatoren von bzw. Datenbank-Links zu Dinatrium-5-Brom-4-chlor-3-indoxylphosphat: CAS-Nummer: 102185-33-1, EG-Nummer: 600-286-2, ECHA-InfoCard: 100.106.217, PubChem: 6097197, ChemSpider: 2006838, Wikidata: Q72452877.

[3] Externe Identifikatoren von bzw. Datenbank-Links zu 5-Brom-4-chlor-3-indoxylphosphat-di-p-Toluidinsalz: CAS-Nummer: 6578-06-9, EG-Nummer: 229-506-1, ECHA-InfoCard: 100.026.824, PubChem: 68768006, ChemSpider: 73132, Wikidata: Q72452880.

[4] James McGadey: A tetrazolium method for non-specific alkaline phosphatase, in: Histochemie, 1970, 23, S. 180–184; PMID 5507043; doi:10.1007/BF00305851.

[5] David A. Knecht, Randall L. Dimond: Visualization of antigenic proteins on Western blots, in: Anal. Biochem., 1984, 136, S. 180–184; PMID 6201085; doi:10.1016/0003-2697(84)90321-X.