HyPer Protein HyPer ist eine veränderte Variante des grün fluoreszierenden Proteins genauer des YFP bei der sich die Flu

HyPer ist eine veränderte Variante des grün fluoreszierenden Proteins (genauer: des YFP), bei der sich die Fluoreszenz redox-abhängig ändert.

GFP aus Aequorea victoria, Wildtyp-Form.

Eigenschaften Bearbeiten

HyPer ist ein Fusionsprotein aus cpYFP und dem Wasserstoffperoxid-sensitiven bakteriellen Protein OxyR. Die Oxidation führt zu einer Spektralverschiebung der Absorption des HyPer von 420 nm zu 500 nm.

Anwendungen Bearbeiten

Das HyPer wird unter anderem als redox-abhängiger Biosensor und als Reporterprotein verwendet. Mit HyPer kann das Wasserstoffperoxid-abhängige Redox-Potential in vivo bestimmt werden. Im endoplasmatischen Retikulum kann mit HyPer die Bildung von Wasserstoffperoxid verfolgt werden. Alternative optische Nachweisverfahren verwenden z. B. Resazurin (synonym AlamarBlue), Dichlorofluorescein (DCF) oder die Proteine roGFP oder rxYFP.

Einzelnachweise Bearbeiten

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[2] K. A. Lukyanov, V. V. Belousov: Genetically encoded fluorescent redox sensors. In: Biochimica et Biophysica Acta. Band 1840, Nummer 2, Februar 2014, S. 745–756, ISSN 0006-3002. doi:10.1016/j.bbagen.2013.05.030 (freier Volltext). PMID 23726987.

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[4] S. G. Rhee, T. S. Chang, W. Jeong, D. Kang: Methods for detection and measurement of hydrogen peroxide inside and outside of cells. In: Molecules and cells. Band 29, Nummer 6, Juni 2010, S. 539–549, ISSN 0219-1032. doi:10.1007/s10059-010-0082-3. PMID 20526816.

[5] I. Mehmeti, S. Lortz, S. Lenzen: The H2O2-sensitive HyPer protein targeted to the endoplasmic reticulum as a mirror of the oxidizing thiol-disulfide milieu. In: Free Radical Biology and Medicine. Band 53, Nummer 7, Oktober 2012, S. 1451–1458, ISSN 1873-4596. doi:10.1016/j.freeradbiomed.2012.08.010. PMID 22921589.

[6] M. Exposito-Rodriguez, P. P. Laissue, G. R. Littlejohn, N. Smirnoff, P. M. Mullineaux: The use of HyPer to examine spatial and temporal changes in H2O2 in high light-exposed plants. In: Methods in Enzymology. Band 527, 2013, S. 185–201, ISSN 1557-7988. doi:10.1016/B978-0-12-405882-8.00010-6. PMID 23830632.

[7] S. Pouvreau: Genetically encoded reactive oxygen species (ROS) and redox indicators. In: Biotechnology journal. Band 9, Nummer 2, Februar 2014, S. 282–293, ISSN 1860-7314. doi:10.1002/biot.201300199. PMID 24497389.