Die Äskulinspaltung, auch bekannt als Äskulinhydrolyse (oder Esculinhydrolyse), wird in der mikrobiologischen Diagnostik eingesetzt, um Bakterienarten, insbesondere aus der Gruppe der Nonfermenter, voneinander zu unterscheiden.
Prinzip Bearbeiten
Einige Bakterienarten, größtenteils aus der Gruppen der Nonfermenter, sind im Stande, mit der von ihnen gebildeten β-Glucosidase Äskulin hydrolytisch in Glucose und Aesculetin zu spalten. Das Äskuletin bildet mit dem Eisen(III)-Ionen der später hinzugegebenen Testlösung eine schwarze Komplexverbindung, welche eine positive Reaktion anzeigt.
Testdurchführung Bearbeiten
Es werden etwa 1 bis 3 Kolonien des zu untersuchenden Bakteriums von einem festen Nährmedium (Agarplatte/Primärkultur) mit Hilfe einer sterilen Impföse in die Äskulin-Bouillon inokuliert. Anschließend bebrütet man die Suspensionskultur für etwa 16 bis 24 Stunden bei 36 ±1 °C. Nach der Inkubation werden etwa 5 Tropfen einer Eisen(III)-chlorid-Lösung zu der Bouillon gegeben.
Der Arbeitsschritt der Zugabe entfällt, hält man ein Aeskulin Agar Medium, das Eisen(III)-chlorid enthält, als Schrägagar in Teströhrchen als fertigen Test auf Vorrat. Bei diesen kann direkt nach dem Anzüchten das Testergebnis abgelesen werden; bei einer positiven Reaktion färbt sich der Schrägagar im Röhrchen schwarz.
Auswertung des Tests Bearbeiten
Positiv: Schwarzfärbung der Bouillon
Negativ: Ausbleiben der Schwarzfärbung
| Äskulin-positive Bakterienarten | Äskulin-negative Bakterienarten |
|---|---|
| Stenotrophomonas maltophilia | Pseudomonas aeruginosa |
| Enterococcus faecalis | Streptococcus agalactiae |
| Pseudomonas luteola | Enterobacter cloacae |
| Sphingomonas paucimobilis | |
| Streptococcus uberis |
Arbeitsmittel, Reagenzien, Nährböden Bearbeiten
- Äskulin-Bouillon
- 10%ige Eisen(III)-chlorid-Lösung
Literatur Bearbeiten
- S. A. Waitkins: Evaluation of rapid methods of identifying group B streptococci. In: Journal of clinical pathology. Band 33, Nummer 3, März 1980, S. 302–305, ISSN 0021-9746. PMID 6991531. PMC 1146056 (freier Volltext).
- J. G. Barr, R. J. Mahood: Complementary use of aesculin hydrolysis and inositol fermentation in the characterisation of Klebsielleae. In: Journal of clinical pathology. Band 30, Nummer 1, Januar 1977, S. 45–49, ISSN 0021-9746. PMID 320229. PMC 476636 (freier Volltext).
Einzelnachweise Bearbeiten
- G. Colman: The classification of streptococcal strains. (1970). Ph.D. Thesis, University of London.