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TBE Puffer ist die Abkürzung für TRIS Borat EDTA Puffer ein nach seinen Bestandteilen TRIS Tris hydroxymethyl aminometha

TBE-Puffer

TBE-Puffer ist die Abkürzung für TRIS-Borat-EDTA-Puffer, ein nach seinen Bestandteilen

benannter Elektrophoresepuffer. TBE-Puffer werden u. a. bei der Agarose-Gelelektrophorese eingesetzt. Dabei variiert die Konzentration des eingesetzten Puffers von Labor zur Labor. In der Regel kommen dabei 0,5-fach oder 1-fach konzentrierter TBE-Puffer zum Einsatz. Die TRIS- und Borsäure-Konzentrationen sind meistens beide gleich und bei einem einfach konzentrierten TBE-Puffer zwischen 50 und 90 millimolar. Die EDTA-Konzentration liegt zwischen 1 und 2 mM. Der pH-Wert wird meistens auf einen Wert zwischen 8 und 8,9 eingestellt.

Für die Herstellung eines TBE-Puffers (1-fach) pH 8,0 werden z. B. 10,8 g (89 mM) TRIS Base, 5,5 g (89 mM) Borsäure und 0,7 g (2 mM) EDTA-Na2 mit destilliertem (entmineralisiertem) Wasser auf 1000 ml aufgefüllt.

Alternativ verwendete Elektrophoresepuffer sind z. B. der TAE-Puffer, der TPE-Puffer, SB-Puffer und der LB-Puffer. Im Vergleich zu TAE-Puffern besitzt TBE-Puffer eine höhere Pufferkapazität. Jedoch neigt er auch zu stärkerem Erhitzen, wodurch etwas niedrigere Spannungen an das Gel angelegt werden müssen. Die Wanderungsgeschwindigkeit ist etwa halb so hoch wie bei TAE-Puffer. Konzentrierte Stammlösungen von TBE-Puffern neigen zum Ausfallen des Tris-Borats, wodurch inhomogene Pufferzusammensetzungen entstehen können.

Einzelnachweise Bearbeiten

  1. Joseph Sambrook, David W. Russell: Molecular Cloning. A laboratory manual. 3 Bände. 3rd edition. Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor NY 2001, ISBN 0-87969-577-3.
  2. ↑ Gerard Meurant: Human Molecular Genetics. Academic Press, 1996, ISBN 978-0-080-53641-5, S. 285.
  3. ↑ Wafik S. El-Deiry: Tumor Suppressor Genes. Springer Science & Business Media, 2003, ISBN 978-1-592-59329-3, S. 93.
  4. ↑ Didier Picard: Nuclear Receptors : A Practical Approach. OUP Oxford, 1999, ISBN 978-0-191-56592-2, S. 47.
  5. ↑ Lela Buckingham: Molecular Diagnostics. F.A. Davis, 2011, ISBN 978-0-803-62975-2. S. 95.
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TBE Puffer ist die Abkurzung fur TRIS Borat EDTA Puffer ein nach seinen Bestandteilen TRIS Tris hydroxymethyl aminomethan Borat Anion der Borsaure und EDTA Ethylendiamintetraessigsaure benannter Elektrophoresepuffer TBE Puffer werden u a bei der Agarose Gelelektrophorese eingesetzt 1 Dabei variiert die Konzentration des eingesetzten Puffers von Labor zur Labor In der Regel kommen dabei 0 5 fach oder 1 fach konzentrierter TBE Puffer zum Einsatz Die TRIS und Borsaure Konzentrationen sind meistens beide gleich und bei einem einfach konzentrierten TBE Puffer zwischen 50 und 90 millimolar 2 3 4 Die EDTA Konzentration liegt zwischen 1 und 2 mM Der pH Wert wird meistens auf einen Wert zwischen 8 und 8 9 eingestellt 2 3 4 Fur die Herstellung eines TBE Puffers 1 fach pH 8 0 werden z B 10 8 g 89 mM TRIS Base 5 5 g 89 mM Borsaure und 0 7 g 2 mM EDTA Na2 mit destilliertem entmineralisiertem Wasser auf 1000 ml aufgefullt Alternativ verwendete Elektrophoresepuffer sind z B der TAE Puffer der TPE Puffer SB Puffer und der LB Puffer Im Vergleich zu TAE Puffern besitzt TBE Puffer eine hohere Pufferkapazitat 5 Jedoch neigt er auch zu starkerem Erhitzen wodurch etwas niedrigere Spannungen an das Gel angelegt werden mussen 5 Die Wanderungsgeschwindigkeit ist etwa halb so hoch wie bei TAE Puffer 5 Konzentrierte Stammlosungen von TBE Puffern neigen zum Ausfallen des Tris Borats wodurch inhomogene Pufferzusammensetzungen entstehen konnen 5 Einzelnachweise Bearbeiten Joseph Sambrook David W Russell Molecular Cloning A laboratory manual 3 Bande 3rd edition Cold Spring Harbor Laboratory Press Cold Spring Harbor NY 2001 ISBN 0 87969 577 3 a b Gerard Meurant Human Molecular Genetics Academic Press 1996 ISBN 978 0 080 53641 5 S 285 a b Wafik S El Deiry Tumor Suppressor Genes Springer Science amp Business Media 2003 ISBN 978 1 592 59329 3 S 93 a b Didier Picard Nuclear Receptors A Practical Approach OUP Oxford 1999 ISBN 978 0 191 56592 2 S 47 a b c d Lela Buckingham Molecular Diagnostics F A Davis 2011 ISBN 978 0 803 62975 2 S 95 Abgerufen von https de wikipedia org w index php title TBE Puffer amp oldid 170085903