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Komplementbindungsreaktion Bei der KBR handelt es sich um einen Test zum Nachweis von Antikörpern Ak im Blutserum mensch

Komplementbindungsreaktion

Bei der Komplementbindungsreaktion (KBR) handelt es sich um einen Test zum Nachweis von Antikörpern (Ak) im Blutserum menschlicher und tierischer Patienten. Die KBR wurde durch den ELISA ersetzt.

Prinzip Bearbeiten

  1. Antigen-Antikörper-Komplexe aktivieren das Komplementsystem, auch Komplement genannt, und führen zum Verbrauch von Komplementfaktoren.
  2. Der Verbrauch dieser Komplementfaktoren ist die Messgröße für die Menge an Antikörpern im Blutserum.
  3. Der Verbrauch von Komplementfaktoren wird über antikörperbeladene Erythrozyten sichtbar gemacht (hämolytisches System).

Daraus ergibt sich:

  • Serum mit spez. Ak → Bildung von Ak-Ag-Komplexen → Komplement wird verbraucht → Komplement kann keine Hämolyse auslösen → Serum ist Ak-positiv
  • Serum ohne spez. Ak → keine Ak-Ag-Komplexe → Komplement noch verfügbar, führt zu → Hämolyse → Serum ist Ak-negativ

Anwendung Bearbeiten

In der Humanmedizin Bearbeiten

Nachweis von Ak gegen:

In der Veterinärmedizin Bearbeiten

Nachweis von Ak gegen:

Vorversuche Bearbeiten

Komplementvorversuch Bearbeiten

Ambozeptorvorversuch Bearbeiten

Antigenvorversuch Bearbeiten

Stattfindende Reaktionen Bearbeiten

  1. Das Patientenserum wird inaktiviert, das heißt, es wird ihm das Komplement entzogen.

Ihm wird Antigen (Ag) des Erregers, gegen den Antikörper (Ak) im Serum nachgewiesen werden sollen und außerdem noch Komplement (das aus Meerschweinchenserum gewonnen wird) zugegeben.

  1. Ist der Patient infiziert, befinden sich also Ak gegen den Erreger im Serum, so binden diese an das zugegebene Ag und bilden einen Komplex. Das Komplement lagert sich zur Verstärkung der Ag-Ak-Reaktion an diesen Komplex an. Sind keine Ak vorhanden, liegen Ag und Komplement frei in der Lösung vor.
  2. Zugabe des hämolytischen Systems. (Das hämolytische System besteht aus Schaferythrozyten und Ak (Ambozeptor) gegen diese: Sie werden gewonnen, indem man z. B. Kaninchen die Schaferythrozyten injiziert → Die Erythrozyten werden vom Kaninchenorganismus als fremd angesehen und es werden Ak gegen sie gebildet → diese isoliert man und gibt sie zusammen mit weiteren Schaferythrozyten als „hämolytisches System“ in den Versuch).

Aus den Schaferythrozyten und den Antischaferythrozyten-Ak bildet sich ein Komplex (die Schaferythrozyten wirken als Ag). Im Fall der Infektion des Patienten ist das Komplement bereits verbraucht und die Schaferythrozyten werden dadurch, dass sich kein Komplement an den Antischaferythrozyten-Ak-Schaferythrozyten-Komplex anlagert, nicht aufgelöst (d. h. keine Hämolyse) → der Test ist positiv, da Ak vorhanden waren. Im negativen Fall steht noch Komplement zur Verfügung, welches sich an den Komplex mit den Schaferythrozyten anlagert und dafür sorgt, dass der Ak seine Arbeit verrichten und die Erythrozyten auflösen kann (→ Hämolyse).

Einzelnachweise Bearbeiten

  1. ↑ Anton Mayr, Michael Rolle: Medizinische Mikrobiologie, Infektions- und Seuchenlehre. Georg Thieme Verlag, 2007. ISBN 9783830410607. S. 127.
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Veröffentlichungsdatum:
Bei der Komplementbindungsreaktion KBR handelt es sich um einen Test zum Nachweis von Antikorpern Ak im Blutserum menschlicher und tierischer Patienten 1 Die KBR wurde durch den ELISA ersetzt 1 Inhaltsverzeichnis 1 Prinzip 2 Anwendung 2 1 In der Humanmedizin 2 2 In der Veterinarmedizin 3 Vorversuche 3 1 Komplementvorversuch 3 2 Ambozeptorvorversuch 3 3 Antigenvorversuch 4 Stattfindende Reaktionen 5 EinzelnachweisePrinzip BearbeitenAntigen Antikorper Komplexe aktivieren das Komplementsystem auch Komplement genannt und fuhren zum Verbrauch von Komplementfaktoren Der Verbrauch dieser Komplementfaktoren ist die Messgrosse fur die Menge an Antikorpern im Blutserum Der Verbrauch von Komplementfaktoren wird uber antikorperbeladene Erythrozyten sichtbar gemacht hamolytisches System Daraus ergibt sich Serum mit spez Ak Bildung von Ak Ag Komplexen Komplement wird verbraucht Komplement kann keine Hamolyse auslosen Serum ist Ak positiv Serum ohne spez Ak keine Ak Ag Komplexe Komplement noch verfugbar fuhrt zu Hamolyse Serum ist Ak negativAnwendung BearbeitenIn der Humanmedizin Bearbeiten Nachweis von Ak gegen Brucellose Erreger Listeriose Erreger Coxsackie Virus Influenza Erreger Coxiella burnetii Treponema pallidum Mycoplasmen InfektionenIn der Veterinarmedizin Bearbeiten Nachweis von Ak gegen Brucella abortus melitensis ovis und suis Burkholderia mallei Rotz Mycoplasma mycoides subspecies Lungenseuche Trypanosoma brucei equiperdum Beschalseuche Leishmania donovani infantumVorversuche BearbeitenKomplementvorversuch Bearbeiten Ziel Bestimmung der optimalen Komplementkonzentration Uberdosierung Zuviel Komplement bewirkt bei einem positiven Patientenserum ein falsch negatives Ergebnis Dieses liegt daran dass das Komplement im Testsystem nicht vollstandig verbraucht wird Somit kommt es zur teilweisen oder vollstandigen Hamolyse Unterdosierung Zuwenig Komplement bewirkt bei einem negativen Patientenserum ein falsch positives Ergebnis Das heisst das Komplement reicht nicht aus um das hamolysierende System teilweise oder vollstandig zu hamolysieren Durchfuhrung Im Komplementvorversuch wird das Patientenserum durch Veronalpuffer ersetzt Das Antigen wird eingesetzt um die mogliche antikomplementare Wirkung des Antigens mit einzubeziehen Auswertung Die hochste Verdunnung die vollstandige Hamolyse zeigt entspricht einer Komplementeinheit Ambozeptorvorversuch Bearbeiten Ziel Bestimmung der optimalen Ambozeptorkonzentration Der Ambozeptor sind Antikorper Ak gegen z B Schaferythrozyten die sich im Versuch an die zugegebenen Schaferythrozyten anlagern und im neg Fall die Komplementfaktoren zu sich hin ziehen was eine Hamolyse dieser Erythrozyten bewirkt Uberdosierung Liegt im Hauptversuch zu viel Ambozeptor vor so kommt es zu einer Agglutination Dieses liegt daran dass ebenfalls Agglutinine vorhanden sind Unterdosierung Beim Hauptversuch fallt ein negatives Patientenserum falsch positiv aus Dieses liegt daran dass die HBK durch den Ambozeptormangel nicht vollstandig gelost werden Durchfuhrung Im Ambozeptorvorversuch werden Patientenserum und Antigen durch Veronalpuffer ersetzt Dieses ist notwendig um gleiche Volumina zu erhalten Auswertung Die hochste Verdunnung die vollstandige Hamolyse zeigt entspricht einer Ambozeptoreinheit Antigenvorversuch Bearbeiten Ziel Bestimmung der optimalen Antigenkonzentration Stattfindende Reaktionen BearbeitenDas Patientenserum wird inaktiviert das heisst es wird ihm das Komplement entzogen Ihm wird Antigen Ag des Erregers gegen den Antikorper Ak im Serum nachgewiesen werden sollen und ausserdem noch Komplement das aus Meerschweinchenserum gewonnen wird zugegeben Ist der Patient infiziert befinden sich also Ak gegen den Erreger im Serum so binden diese an das zugegebene Ag und bilden einen Komplex Das Komplement lagert sich zur Verstarkung der Ag Ak Reaktion an diesen Komplex an Sind keine Ak vorhanden liegen Ag und Komplement frei in der Losung vor Zugabe des hamolytischen Systems Das hamolytische System besteht aus Schaferythrozyten und Ak Ambozeptor gegen diese Sie werden gewonnen indem man z B Kaninchen die Schaferythrozyten injiziert Die Erythrozyten werden vom Kaninchenorganismus als fremd angesehen und es werden Ak gegen sie gebildet diese isoliert man und gibt sie zusammen mit weiteren Schaferythrozyten als hamolytisches System in den Versuch Aus den Schaferythrozyten und den Antischaferythrozyten Ak bildet sich ein Komplex die Schaferythrozyten wirken als Ag Im Fall der Infektion des Patienten ist das Komplement bereits verbraucht und die Schaferythrozyten werden dadurch dass sich kein Komplement an den Antischaferythrozyten Ak Schaferythrozyten Komplex anlagert nicht aufgelost d h keine Hamolyse der Test ist positiv da Ak vorhanden waren Im negativen Fall steht noch Komplement zur Verfugung welches sich an den Komplex mit den Schaferythrozyten anlagert und dafur sorgt dass der Ak seine Arbeit verrichten und die Erythrozyten auflosen kann Hamolyse Einzelnachweise Bearbeiten a b Anton Mayr Michael Rolle Medizinische Mikrobiologie Infektions und Seuchenlehre Georg Thieme Verlag 2007 ISBN 9783830410607 S 127 Dieser Artikel behandelt ein Gesundheitsthema Er dient nicht der Selbstdiagnose und ersetzt nicht eine Diagnose durch einen Arzt Bitte hierzu den Hinweis zu Gesundheitsthemen beachten Abgerufen von https de wikipedia org w index php title Komplementbindungsreaktion amp oldid 220104789